如何改進ELISA試劑盒在實驗中的錯誤呢?

更新時間：2021-07-07

瀏覽次數：1429

　　ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟,新手操作難免出錯.其中許多錯誤是由不充分的細節造成的.有很多方法可以減少這種錯誤,比如在做實驗時少說話,以防止唾液掉進酶的標簽中.當然,我們也要學會探索自己的問題,找出原因.那么,我們如何改進ELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?

　　1 評價試劑的實用性試劑的穩定性對準確度非常重要.在啟用試劑盒之前,應重復檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用.

　　2 操作前仔細閱讀試劑盒說明書嚴格按照說明書要求進行標準化操作.不同批號的試劑不混合.值得改進的是,只有經過反復的試驗,如洗盤的數量,才能加以改進.

　　3 加樣要準確快速樣品添加的不準確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果.此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和終液體的加入量有關,因此樣品的裝載應謹慎.需要在一定時間內完成采樣的實驗,如果采樣速度慢,會出現誤差,試劑會暴露很長時間,特別是當室溫過高時,保質期會縮短甚至失效.

　　4 檢驗技術人員應具備實驗室操作的基本素質和實踐經驗.檢測技術人員能夠熟練操作實驗儀器儀表,具有一定的總結和分析問題的能力,能及時妥善地解決試劑盒實驗中出現的意外情況.

　　5 洗滌要*洗版不*,酶偶聯物的背景顏色為假陽性.此外,清潔劑應該是新鮮的,可以隨時使用.舊的洗滌劑會增加背景,也可能出現假陽性.

　　6 嚴控試劑盒實驗反應時間試劑盒反應時間過長,酶被滅活,反應時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結合,產物結構松散不穩定,易清洗,易產生假陰性.